Diagnóstico
de chagas
Serología para chagas, un desafío
para el laboratorio clínico
Inmunoserología. Por Dra. Liliana D'Agostino
En Argentina, aproximadamente 2 millones de personas se encuentran infectadas
con Tripanosoma cruzi, agente etiológico de la enfermedad de Chagas,
que es endémica en toda Latino América, cuyo vector es el
Triatoma infestans. Si bien la seroprevalencia ha disminuido desde 5.8
% en 1981 a 1.8 % en 1994, sus implicancias para la salud pública
constituyen una preocupación. La transfusión sanguínea
es una de las vías de transmisión más importantes,
ya que la migración de personas infectadas desde áreas en
las que la enfermedad es endémica a centros urbanos, donde no existe
el vector, es frecuente. En nuestro país es obligatorio el examen
de la sangre de donantes por al menos dos técnicas serológicas.
Además para evitar el riesgo de transmisión congénita
se debe realizar en la mujer embarazada un análisis para conocer
su reactividad serológica e instaurar una conducta terapéutica
adecuada para el seguimiento de los hijos de mujeres infectadas. El diagnóstico
en el estadío crónico se realiza mediante la detección
de anticuerpos en suero ya que el diagnóstico parasitológico
en estos estadíos carece de sensibilidad.
Los tests de screening incluyen la reacción de Inmunofluorescencia
Indirecta (IFI), la Hemoaglutinación Indirecta (HAI) y el Enzimoinmunoanálisis(EIA).Las
dos primeras pueden resultar con falsos positivos o negativos debido a
la subjetividad en la interpretación, por esa razón se confirman
generalmente mediante el Enzimoinmunoanálisis.
La selección de pruebas serológicas debe ser eficiente tanto
como para identificar y descartar la sangre contaminada como para realizar
el diagnóstico oportuno del paciente infectado.
Debe tenerse en cuenta la diversidad de antígenos utilizados en
la fabricación de los reactivos: desde extractos crudos del parásito,
fracciones subcelulares, hasta antígenos clonados y péptidos
sintéticos. Por cuanto la variabilidad en sensibilidad y especificidad
de los diferentes kits reactivos es muy grande. Los antígenos recombinantes
son más específicos que los extractos del parásito
que pueden dar reacción cruzada con el suero proveniente de pacientes
con leishmaniasis, Tripanosoma rangeli, sífilis, o fiebre reumática.
La sensibilidad de los diferentes antígenos recombinantes varía
con el estadío clínico del paciente, en general se utiliza
la combinación de distintos antígenos recombinantes con
el propósito de incrementar la sensibilidad. Sin embargo, algunos
de estos antígenos recombinantes o péptidos sintéticos
pueden presentar residuos de aminoácidos que se asemejen a aquellos
de otros microorganismos, resultando una reacción cruzada por mimetismo
molecular. Para evitar esto último se ha propuesto el uso de un
ensayo multiparamétrico que mide la reactividad a diferentes antígenos
por separado reduciendo la posibilidad de reacción cruzada. Consiste
en un ensayo en el que siete antígenos sintéticos y recombinantes
de T. cruzi recubren en forma de líneas una membrana de nylon,
estas tiras además contienen líneas control. Las tiras se
incuban con una dilución del suero ( tiempo y temperatura indicados
por el fabricante), se lavan, los complejos inmunes se detectan por incubación
con un conjugado de anti-IgG humana y el desarrollo de color. Los resultados
se evalúan visualmente comparando la intensidad de las líneas
de antígeno con los controles. Un suero se considera negativo si
no aparece ninguna banda o sí las bandas aparecen con intensidad
muy baja respecto del control y es positivo cuando al menos dos bandas
muestran un intensidad significativa (estas intensidades se determina
por un score dado por el fabricante)
La intención de la presente comunicación no es solamente
informar sobre una nueva herramienta diagnóstica, sino la necesidad
de diseñar algoritmos que involucren dos o tres tests de distinta
configuración ya que no existe un test de referencia (gold standard)
para definir el estado serológico de la enfermedad de Chagas. Uno
de los objetivos del PEEC es promover entre los participantes la implementación
de normas de trabajo que le permitan alcanzar un nivel óptimo en
el desempeño, mediante la adherencia a buenas prácticas
de laboratorio, implementación de control de calidad interno, para
lograr minimizar el número de sueros con resultados discrepantes.
Todo esto debe acompañarse con un buen control de los reactivos
comerciales disponibles en el mercado.
Bibliografía:
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"Serological Confirmation of Chagas´Disease by a Recombinant
and Peptide Antigen Line Immunoassay: INNO-LIA Chagas." J. Clin Mic,
Feb 2000, p.851-854, Vol 38, N°2.
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Medicina 1999;59 Suppl 2:91-6
"Antibodies to Trypanosoma cruzi among blood donors in Buenos Aires,
Argentina"; Int J Infect Dis 2001; 5(2): 89-93
"Prevalence of Trypanosoma cruzi antibodies in blood donors"
Medicina 1999; 59(2): 129-32
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